jembio Tth 111 逆轉(zhuǎn)錄酶說(shuō)明書   

   Thermus thermopilus Reverse Transcriptase 在 Mn2+ 存在的情況下在高溫下催化 RNA 逆轉(zhuǎn)錄為 cDNA。

來(lái)源：嗜熱棲熱菌

描述：

• 適用于DNA 的高溫合成(1)。

• 從 RNA 模板合成 cDNA (2)。

• 引物雜交和 RNA 延伸的特異性更高。

• 可以在高溫下進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄 (2)。

• 最大限度地減少RNA 二級(jí)結(jié)構(gòu)強(qiáng)的問(wèn)題。

• 用于DNA 的有效PCR，包含有問(wèn)題的二級(jí)結(jié)構(gòu)。

• 適用于RT-PCR；相同的酶用于逆轉(zhuǎn)錄和后續(xù)擴(kuò)增獲得的 cDNA 模板 (2)。

• 對(duì)從有問(wèn)題的樣本中分離的模板 DNA 中存在的擴(kuò)增抑制劑具有抗性 (3,4)。           

單位定義：一個(gè)單位是在 50°C 下 10 分鐘內(nèi)將 1 nmol dTTP 摻入酸不溶形式所需的酶量。

儲(chǔ)存條件：儲(chǔ)存在 –20°C。

儲(chǔ)存緩沖液：50 mM Tris-HCl（22°C 時(shí) pH 7.5）、5 mM 二硫蘇糖醇、0.1 mM EDTA、50% (v/v) 甘油和穩(wěn)定劑。

檢測(cè)條件：40 mM Tris-HCl（22°C 時(shí) pH 8.5）、1 mM MnCl2、1 mg/ml 牛血清白蛋白、10 mM 二硫蘇糖醇、0.5 mM [α-32P] dTTP 和 0.4 mM poly(A)·( dT)50。

在 50°C 下孵育 10 分鐘，反應(yīng)體積為 50 µl。

質(zhì)量控制：對(duì)所有制劑進(jìn)行污染內(nèi)切核酸酶、外切核酸酶、非特異性 RNase 以及單鏈和雙鏈 DNase 活性的檢測(cè)。