KlenTaq-S說明書
KlenTaq-S是一種熱穩(wěn)定性 DNA聚合酶,由基因的 5' 缺失和 Tabor 和 Richardson 的點(diǎn)突變 F667Y 表達(dá),編碼棲熱菌 DNA 聚合酶。該酶進(jìn)行聚合酶鏈反應(yīng)的速度比 KlenTaq1 和全長(zhǎng) Taq DNA 聚合酶慢,但它接受的 ddNTP 是 Taq 的 100-5000 倍。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)這種酶 KlenTaq-S 最重要的特性是在焦磷酸解活化聚合 (PAP) 反應(yīng)中,在該反應(yīng)中可以在數(shù)十億個(gè)野生型等位基因拷貝中檢測(cè)到單個(gè)堿基突變(Liu 和 Sommer:生物技術(shù),第 36 卷,第 156-166 頁,2004 年)。到達(dá)后將酶儲(chǔ)存在 -200°C。
儲(chǔ)存緩沖液中的甘油可防止在 -200 C 下凍結(jié),但非離子洗滌劑 Thesit 在此溫度下會(huì)導(dǎo)致一些增稠。這是可選的,但建議在分配前在冰上加熱至 00 C。對(duì)于長(zhǎng)期儲(chǔ)存,可以采用 -70 到 -800°C,但我們確保酶冷凍不超過兩次。重新冷凍和解凍會(huì)導(dǎo)致酶活性降低。儲(chǔ)存緩沖液為 50% 甘油 (v/v; 63% w/v)、50 mM 硫酸銨、20 mM Tris-HCl pH 8.55、0.1 mM EDTA、10 mM 巰基乙醇、無明膠和 0.5% Thesit。摩爾。重量 : ~ 62 kD
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