haemtech 0030說明書
人因子VII
的域結(jié)構(gòu)表示為人因子VII的域結(jié)構(gòu),其中:GLA =包含γ-羧基谷氨酸殘基的區(qū)域,EGF =包含與人表皮生長因子同源的序列的區(qū)域,CATALYTIC DOMAIN =包含絲氨酸蛋白酶催化三聯(lián)體的區(qū)域。Xa因子裂解VII因子形成VIIa的位點(diǎn)用箭頭表示。
尺寸 | 20微克 |
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公式 | 50%甘油/水(v / v) |
存儲(chǔ) | -20°攝氏度 |
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純度 | 通過SDS-PAGE,> 95% |
活性測(cè)定 | 凝血測(cè)定 |
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保質(zhì)期(正確存放) | 12個(gè)月 |
人因子VII是在肝臟中合成的單鏈依賴維生素K的血漿糖蛋白(1-3)。在分泌到血液中之前,維生素K依賴性羧化酶進(jìn)行的翻譯后修飾會(huì)在分子的NH2末端部分產(chǎn)生十個(gè)羧基谷氨酸(gla)殘基,從而促進(jìn)細(xì)胞膜結(jié)合。凝血期間凝血因子VII被蛋白水解活化為絲氨酸蛋白酶凝血因子VIIa。凝血因子,凝血因子IXa,凝血因子Xa或凝血因子XIIa可以激活凝血因子VII。激活導(dǎo)致單鏈分子在精氨酸152的COOH末端側(cè)裂解,從而產(chǎn)生NH2末端衍生的輕鏈(Mr = 20,000)和COOH末端衍生的重鏈(Mr = 30,000)通過一個(gè)二硫鍵共價(jià)結(jié)合 輕鏈區(qū)包含gla結(jié)構(gòu)域以及與人表皮生長因子(EGF)同源的兩個(gè)生長因子結(jié)構(gòu)域。在因子VII中鑒定的單個(gè)β-羥基天冬氨酸也位于輕鏈區(qū)域。因子VIIa的重鏈區(qū)域包含催化結(jié)構(gòu)域。因子VIIa和輔助因子(組織因子)可能以鈣依賴性方式結(jié)合在帶負(fù)電荷的細(xì)胞表面上,形成外在因子Xase酶復(fù)合物。該酶復(fù)合物催化因子IX向因子IXa的轉(zhuǎn)化以及因子X向因子Xa的轉(zhuǎn)化。已經(jīng)分離出因子VII的cDNA,并確定了核苷酸序列(4)。因子VII與包括因子IX,因子X和蛋白C在內(nèi)的其他絲氨酸蛋白酶具有廣泛的序列同源性。以及兩個(gè)與人表皮生長因子(EGF)同源的生長因子域。在因子VII中鑒定的單個(gè)β-羥基天冬氨酸也位于輕鏈區(qū)域。因子VIIa的重鏈區(qū)域包含催化結(jié)構(gòu)域。因子VIIa和輔助因子(組織因子)可能以鈣依賴性方式結(jié)合在帶負(fù)電荷的細(xì)胞表面,形成外在因子Xase酶復(fù)合物。該酶復(fù)合物催化因子IX向因子IXa的轉(zhuǎn)化以及因子X向因子Xa的轉(zhuǎn)化。已經(jīng)分離出因子VII的cDNA并確定了核苷酸序列(4)。因子VII與包括因子IX,因子X和蛋白C在內(nèi)的其他絲氨酸蛋白酶具有廣泛的序列同源性。以及兩個(gè)與人表皮生長因子(EGF)同源的生長因子域。在因子VII中鑒定的單個(gè)β-羥基天冬氨酸也位于輕鏈區(qū)域。因子VIIa的重鏈區(qū)域包含催化結(jié)構(gòu)域。因子VIIa和輔助因子(組織因子)可能以鈣依賴性方式結(jié)合在帶負(fù)電荷的細(xì)胞表面,形成外在因子Xase酶復(fù)合物。該酶復(fù)合物催化因子IX向因子IXa的轉(zhuǎn)化以及因子X向因子Xa的轉(zhuǎn)化。已經(jīng)分離出因子VII的cDNA并確定了核苷酸序列(4)。因子VII與包括因子IX,因子X和蛋白C在內(nèi)的其他絲氨酸蛋白酶具有廣泛的序列同源性。在因子VII中鑒定的單個(gè)β-羥基天冬氨酸也位于輕鏈區(qū)域。因子VIIa的重鏈區(qū)域包含催化結(jié)構(gòu)域。因子VIIa和輔助因子(組織因子)可能以鈣依賴性方式結(jié)合在帶負(fù)電荷的細(xì)胞表面上,形成外在因子Xase酶復(fù)合物。該酶復(fù)合物催化因子IX向因子IXa的轉(zhuǎn)化以及因子X向因子Xa的轉(zhuǎn)化。已經(jīng)分離出因子VII的cDNA并確定了核苷酸序列(4)。因子VII與包括因子IX,因子X和蛋白C在內(nèi)的其他絲氨酸蛋白酶具有廣泛的序列同源性。在因子VII中鑒定的單個(gè)β-羥基天冬氨酸也位于輕鏈區(qū)域。因子VIIa的重鏈區(qū)域包含催化結(jié)構(gòu)域。因子VIIa和輔助因子(組織因子)可能以鈣依賴性方式結(jié)合在帶負(fù)電荷的細(xì)胞表面上,形成外在因子Xase酶復(fù)合物。該酶復(fù)合物催化因子IX向因子IXa的轉(zhuǎn)化以及因子X向因子Xa的轉(zhuǎn)化。已經(jīng)分離出因子VII的cDNA并確定了核苷酸序列(4)。因子VII與包括因子IX,因子X和蛋白C在內(nèi)的其他絲氨酸蛋白酶具有廣泛的序列同源性。可以以鈣依賴性方式在帶負(fù)電荷的細(xì)胞表面上結(jié)合以形成外在因子Xase酶復(fù)合物。該酶復(fù)合物催化因子IX向因子IXa的轉(zhuǎn)化以及因子X向因子Xa的轉(zhuǎn)化。已經(jīng)分離出因子VII的cDNA并確定了核苷酸序列(4)。因子VII與包括因子IX,因子X和蛋白C在內(nèi)的其他絲氨酸蛋白酶具有廣泛的序列同源性??梢砸遭}依賴性方式在帶負(fù)電荷的細(xì)胞表面上結(jié)合以形成外在因子Xase酶復(fù)合物。該酶復(fù)合物催化因子IX向因子IXa的轉(zhuǎn)化以及因子X向因子Xa的轉(zhuǎn)化。已經(jīng)分離出因子VII的cDNA并確定了核苷酸序列(4)。因子VII與包括因子IX,因子X和蛋白C在內(nèi)的其他絲氨酸蛋白酶具有廣泛的序列同源性。
人因子VII使用常規(guī)技術(shù)(2)和免疫親和色譜(5)的組合進(jìn)行純化。純化的蛋白質(zhì)以50%(體積/體積)的甘油/水的形式提供,應(yīng)儲(chǔ)存在-20oC下。通過SDS-PAGE分析確定純度,并在VII因子凝血測(cè)定中測(cè)量活性。
凝膠 | Novex 4-12%Bis-Tris |
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加載 | 人因子VII,每泳道1 µg |
緩沖 | 拖把 |
標(biāo)準(zhǔn) | 參見BluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa) |
本土化 | 等離子體 | |||||
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血漿濃度 | 0.5 µg / ml(2)-(基于活度測(cè)量) | |||||
行動(dòng)方式 | Zymogen; 絲氨酸蛋白酶因子VIIa的前體 | |||||
分子量 | 50,000(2) | |||||
消光系數(shù) |
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等電點(diǎn) | 4.8-5.1(6)-(基于牛因子VII的分析) | |||||
結(jié)構(gòu)體 | 單鏈,NH2-末端gla結(jié)構(gòu)域,兩個(gè)EGF結(jié)構(gòu)域 | |||||
碳水化合物百分比 | 13%(7)-(基于牛因子VII的分析) | |||||
翻譯后修飾 | 1個(gè)β-羥基天冬氨酸(8),10個(gè)gla殘基(9) |
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