genefirst一家專注于傳染病,癌癥診斷和個(gè)性化醫(yī)學(xué)的分子診斷公司。我們?yōu)檠芯咳藛T,臨床醫(yī)生和制藥公司提供功能強(qiáng)大,易于使用且靈敏的分子診斷解決方案,以準(zhǔn)確診斷和提供安全有效的藥物。
XCeloSeq文庫制備產(chǎn)品采用了獲得的GeneFirst突破性技術(shù)ATOM-Seq®。這種方法使用一種簡單而優(yōu)雅的化學(xué)方法來捕獲DNA,原始分子充當(dāng)引物,其3'端通過聚合酶延伸。
使用ATOM-Seq方法,將分子標(biāo)識(shí)符(UMI)和通用銜接子序列直接并入每個(gè)原始樣品分子的可用3'端。
樣品DNA或cDNA與銜接子模板寡核苷酸結(jié)合
DNA分子退火至ATO的3'末端。
ATO反應(yīng)
?
動(dòng)手時(shí)間: 5分鐘
孵育時(shí)間:70分鐘
退火后,聚合酶以ATO序列為模板延伸原始分子。
使用其ATO模板,聚合酶將分子標(biāo)識(shí)符(UMI)和通用引物位點(diǎn)整合到捕獲的分子中。
線性放大
?
動(dòng)手時(shí)間:5分鐘
孵育時(shí)間:35分鐘
通用引物用于多輪線性擴(kuò)增,從而改善了誤差校正。這也意味著即使線性產(chǎn)物在有義和反義鏈靶向富集之間進(jìn)行劃分,所有原始副本都可以在下游反應(yīng)中顯示
下游協(xié)議
方案時(shí)間包括所示的所有步驟,從初的ATO反應(yīng)到終的珠子純化文庫。
這種*的方法無需連接,并且通過僅需一個(gè)靶標(biāo)特異性引物進(jìn)行富集即可與傳統(tǒng)的基于PCR的方法區(qū)分開。這提供了許多優(yōu)勢,使XCeloSeq特別適合于挑戰(zhàn)性臨床材料,例如液體活檢或FFPE保留的RNA中的無細(xì)胞DNA(cfDNA)。
綠色的勾表示技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)的方面。
綠色條表示技術(shù)效率低下的方面。
紅叉表示該技術(shù)不能或不能做到的方面。
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