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parrinst 4635說(shuō)明書

更新時(shí)間:2019-04-30      點(diǎn)擊次數(shù):1837

 

Parr Instrument Company是一家私人控股公司,位于伊利諾伊州莫林市211-53rd街,從事設(shè)計(jì),制造和銷售用于測(cè)試燃料以及在熱和壓力下進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)和測(cè)試的實(shí)驗(yàn)室儀器和設(shè)備。

Parr反應(yīng)器和壓力容器包括標(biāo)準(zhǔn)設(shè)計(jì)和實(shí)驗(yàn)室到小型試驗(yàn)工廠規(guī)模的定制設(shè)備。這種壓力設(shè)備的用途廣泛應(yīng)用于化學(xué),石化,制藥和生物技術(shù)研究,開發(fā)和控制實(shí)驗(yàn)室。

Parr量熱計(jì)用于測(cè)試各種固體和液體燃料,食品和其他可燃材料。許多*的設(shè)計(jì)和高度自動(dòng)化的儀表已經(jīng)添加到其不斷擴(kuò)展的燃料測(cè)試儀器系列中。

parrinst 4635說(shuō)明書

4635 Cell Disruption Vessel

4635細(xì)胞破裂血管

4635細(xì)胞破裂血管4635細(xì)胞破裂血管

4635,920 mL容器是通用型號(hào),具有處理大小從幾毫升到600毫升的樣品的能力。

 

包括氮?dú)馓畛溥B接

每個(gè)容器配備一個(gè)1831氮?dú)馓畛溥B接,提供從商用氮?dú)馄刻畛淙萜魉璧乃信浼?831連接包括一個(gè)帶標(biāo)準(zhǔn)CGA-580聯(lián)軸器的控制閥,用于連接氮?dú)馄浚迚毫τ?jì)和用于連接容器入口閥的柔性尼龍壓力軟管。每個(gè)容器都包括用于容器頭的額外O形環(huán)。

 

4635細(xì)胞破裂血管應(yīng)用

許多應(yīng)用

氮減壓方法特別適用于治療哺乳動(dòng)物和其他膜結(jié)合細(xì)胞。它還成功地用于處理植物細(xì)胞,從受精卵釋放病毒和治療脆弱的細(xì)菌。不建議用于未經(jīng)處理的細(xì)菌細(xì)胞,但可以通過(guò)使用各種預(yù)處理程序來(lái)削弱細(xì)胞壁來(lái)消除這種限制。酵母,真菌,孢子和其他具有堅(jiān)硬壁的材料對(duì)這種方法反應(yīng)不佳。

應(yīng)用和技術(shù)

哺乳動(dòng)物細(xì)胞

Hunter和Commerford(1)于1961年發(fā)表了一篇論文,該論文已成為通過(guò)氮減壓方法破壞哺乳動(dòng)物組織的基本“烹飪手冊(cè)”。盡管這些作者報(bào)道的大部分工作都是用大鼠組織完成的,但他們也治療了脾臟,白細(xì)胞,淋巴結(jié),腫瘤,胸腺和其他組織,以確定該方法的一般適用性。他們的結(jié)果清楚地表明,通過(guò)這種方法可以破壞細(xì)胞,對(duì)組分的物理和化學(xué)損害小。

H&C在1300psi及以上的壓力下獲得*破壞,而低于700psi的壓力使全細(xì)胞和勻漿中的細(xì)胞團(tuán)塊離開。在800和1000psi之間的壓力下,產(chǎn)生細(xì)胞完整的無(wú)細(xì)胞勻漿。在容器中處理之前,使用手壓機(jī)預(yù)先切碎組織。發(fā)現(xiàn)細(xì)胞核的狀態(tài)取決于懸浮緩沖溶液的組成。使用等滲溶液獲得了良好的結(jié)果,而在懸浮于非常稀的溶液中的細(xì)胞中觀察到核膨脹和破裂。這歸因于滲透膨脹,H&C發(fā)現(xiàn)可以通過(guò)添加無(wú)機(jī)鹽(例如氯化鈉)或有機(jī)溶質(zhì)(例如蔗糖或甘油)來(lái)控制滲透膨脹。當(dāng)懸浮介質(zhì)不含鈣時(shí),細(xì)胞核非常脆弱,但發(fā)現(xiàn)存在少至0.0002M的氯化鈣可穩(wěn)定核。乙酸鎂也可用于此目的。

為了確定對(duì)不穩(wěn)定細(xì)胞的損害程度,H&C研究了脫氧核糖核蛋白DNP,因?yàn)樗资芑瘜W(xué)和物理應(yīng)力的影響,從核部分中獲得超過(guò)90%的DNP回收率,并且具有優(yōu)異的材料保存性。他們還比較了通過(guò)氮減壓方法制備的線粒體懸浮液與PotterElvehjem勻漿器中產(chǎn)生的懸浮液的酶活性。沒(méi)有檢測(cè)到酶活性的差異。

Dowben,Gaffey和Lynch(2)使用氮減壓技術(shù)從L細(xì)胞,成纖維細(xì)胞,羊水中的人類胎兒細(xì)胞,大鼠肝臟和雞胚肌肉制備多聚核糖體。使用600psi壓力,它們獲得優(yōu)于99.9%的破裂并且回收超過(guò)95%的原子核。多聚體產(chǎn)率比在Dounce組織研磨機(jī)中均質(zhì)化細(xì)胞時(shí)高兩到三倍。此外,它們具有更好的定義和更可重復(fù)的配置文件。還報(bào)道了通過(guò)氨基酸摻入測(cè)量的顯著更高的活性。

Short,Maines和Davis(4)將氮減壓方法與Potter-Elvehjem類型的PTFE研杵和玻璃管均質(zhì)器進(jìn)行比較,以制備用于藥物代謝研究的微粒體級(jí)分。減壓方法一致地產(chǎn)生超過(guò)杵和管分餾的每克組織的微粒體蛋白質(zhì)的兩倍。發(fā)現(xiàn)每毫克微粒體蛋白的酶活性對(duì)于兩種方法基本相同,但必須記住,氮減壓產(chǎn)生的微粒體蛋白質(zhì)是每克原料的兩倍多。

在顯微鏡檢查下,發(fā)現(xiàn)通過(guò)減壓方法產(chǎn)生的勻漿是無(wú)細(xì)胞的,而在研杵和管??勻漿中觀察到許多細(xì)胞團(tuán)塊。微粒體顆粒的電子顯微鏡顯示,對(duì)于減壓方法,顆粒更小并且尺寸更均勻。總之,這些作者指出,氮?dú)鉁p壓方法比PTFE杵和玻璃管方法更有效,可能變化更小。

與杵和管方法的比較。在芝加哥退伍軍人管理研究醫(yī)院的近申請(qǐng)中,用細(xì)胞破碎容器在15分鐘內(nèi)制備了用杵和管生產(chǎn)需要8小時(shí)的勻漿。在另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室中,每天使用細(xì)胞破碎容器將高達(dá)12千克的大腦均質(zhì)化。

Wallach及其同事(5)使用氮減壓方法獲得完整的細(xì)胞分離,核損傷小。使用0.0002M醋酸鎂緩沖液與Ehrlich Ascites Carcinoma細(xì)胞一起工作,他們研究了磷脂的細(xì)胞分布。Wallach發(fā)表了許多其他論文,其中減壓技術(shù)已被用于制備細(xì)胞膜。

疫苗準(zhǔn)備

許多商業(yè)實(shí)驗(yàn)室發(fā)現(xiàn)氮減壓技術(shù)對(duì)于從受精卵中釋放病毒非常有效。該方法可以使用Parr為此目的提供的較大破碎容器按比例放大用于商業(yè)生產(chǎn)。

細(xì)菌細(xì)胞

弗雷澤(7)于1951年發(fā)表了一些關(guān)于氮減壓及其對(duì)大腸桿菌影響的早研究。弗雷澤的工作受到限制,因?yàn)樗拇槐幌拗圃?00 psi的工作壓力下。然而,使用在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期收獲的大腸桿菌,他能夠在一次通過(guò)中獲得75%的破裂并且在連續(xù)兩次通過(guò)中獲得超過(guò)90%的破裂。與其他具有堅(jiān)韌細(xì)胞壁的細(xì)菌和生物體的結(jié)果混合在一起。

有幾種方法可以處理具有堅(jiān)韌壁的細(xì)菌細(xì)胞以通過(guò)氮減壓方法促進(jìn)破壞。這些措施包括:(1)在整個(gè)墻壁發(fā)育之前的早期生長(zhǎng)階段收獲細(xì)胞; (2)在抑制細(xì)胞壁形成的試劑存在下培養(yǎng)細(xì)胞; (3)在加工前使用溶菌酶削弱壁,或(4)在應(yīng)用氮?dú)鉁p壓法之前使用機(jī)械預(yù)處理來(lái)削弱細(xì)胞壁。盡管這些技術(shù)已成功應(yīng)用于許多具有重細(xì)胞壁的細(xì)菌,但它們對(duì)酵母,真菌,孢子和具有非常重或堅(jiān)硬壁的類似細(xì)胞不是同樣有效的。

植物細(xì)胞

Loewus和Loewus(10)發(fā)表了許多論文,其中描述了氮破壞程序在植物細(xì)胞和組織培養(yǎng)植物細(xì)胞中的應(yīng)用。他們還報(bào)告說(shuō)通過(guò)這種方法打破硅藻取得了相當(dāng)大的成功。

參考

(1)Hunter,MJ和Commerford,SL,1961,“哺乳動(dòng)物組織的壓力均質(zhì)化。”Biochim。生物物理學(xué)。Acta,47:580-6。
(2)Dowben,RM,Gaffey,TA和Lynch,PA,1968。“通過(guò)氮?dú)馕g破壞細(xì)胞后高產(chǎn)率地分離肝肌多聚核糖體。”FEBS Letters,Vol。2,,第1-3頁(yè)。
(3)Dowben,RM,Lynch,PM,Nadler,HC和Hsia,DY,1969。“來(lái)自L. Cells的Polyribosomes。”Exp。細(xì)胞研究,58:167-9。
(4)簡(jiǎn),CR,Maines,MD和Davis,LE,1972。“通過(guò)快速減壓均質(zhì)化制備用于藥物代謝研究的肝微粒體部分。”Proc。SOC。EXPER。生物學(xué)。Med。,140:58-65。
(5)Wallach,DFH,Soderberg,J。和Bricker,L.,1960。“Ehrlich和腹水癌細(xì)胞的磷脂組成和intracelfular distribution。”Cancer Research,20:397-402。
(6)Manson,LA,F(xiàn)oshi,GV和Palm,J.,1963。“移植抗原與正常和惡性小鼠組織的微粒體pipoprotein的關(guān)聯(lián)。”J. Cell and ComD。生理學(xué),61:109-18。
(7)弗雷澤,D.,1951年。“通過(guò)釋放氣體壓力來(lái)破滅細(xì)菌。”自然,167:33-4。
(8)Avis,PJG,1967。“在亞細(xì)胞成分,制備和分餾中。”(Ed.Birnie,GD和Fox,SM)Chapt。1,哺乳動(dòng)物細(xì)胞的壓力均質(zhì)化。由紐約Plenum出版社出版。
(9)Manson,LA,1972“通過(guò)壓力均質(zhì)化提取膜性移植抗原。”(Ed.Kahan,BD和Reiifeld,RA)。9,移植抗原。由紐約Academic Press出版。
(10)Loewus,MW和Loewus,F(xiàn).,1971。“從acer pseudoplatanus L.細(xì)胞培養(yǎng)物中分離和表征d-葡萄糖6-磷酸環(huán)化酶(NDA依賴性)。植物生理學(xué)。(1971)48:255-260。

 

 

 

 

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