wisegeneusa K003說明書
wisegeneusa的使命是開發(fā),制造和提供新型基因組測(cè)序和檢測(cè)技術(shù)的研究工具。我們將繼續(xù)許可,開發(fā)和商業(yè)化表觀遺傳學(xué)中的新基因組測(cè)序試劑和方法。
5-羥甲基胞嘧啶是一種DNA甲基化修飾,由鐵依賴性脫氧酶的Tet家族酶促氧化5-甲基胞嘧啶(5-mC)而發(fā)生
關(guān)于我們的TAB-seq套件,請(qǐng)注意以下事項(xiàng)。
TAB-seqβGT保護(hù)效率說明
關(guān)于我們的TAB-seq套件,請(qǐng)注意以下事項(xiàng):
1.我們提供的5hmC加標(biāo)對(duì)照通過使用5-羥甲基胞嘧啶dNTP混合物的PCR擴(kuò)增產(chǎn)生。原則上,5hmC加標(biāo)對(duì)照中的所有胞嘧啶應(yīng)該是100%羥甲基化的。然而,由于商業(yè)化5hmdCTP的雜質(zhì)和暴露于空氣中5hmC的緩慢氧化,5hmC加標(biāo)對(duì)照中每個(gè)胞嘧啶位點(diǎn)的實(shí)際5hmC豐度約為80%。結(jié)果,即使在標(biāo)準(zhǔn)亞硫酸氫鹽測(cè)序中,5hmC加標(biāo)對(duì)照中僅80%的胞嘧啶將被讀作'C'。該數(shù)量(~80%)可能會(huì)根據(jù)5hmC加標(biāo)控制的存儲(chǔ)條件/時(shí)間而變化。
為了準(zhǔn)確評(píng)估TAB-seq中5hmC的保護(hù)率,我們建議對(duì)含有相同批次的5hmC加標(biāo)對(duì)照的一個(gè)樣品進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)亞硫酸氫鹽測(cè)序,以確定其真正的5hmC豐度。例如,如果5hmC加標(biāo)對(duì)照中80%的胞嘧啶在標(biāo)準(zhǔn)亞硫酸氫鹽測(cè)序中讀作'C',其中70%在TAB-seq中讀作'C',則表明您的TAB-的實(shí)際保護(hù)率seq測(cè)定應(yīng)為0.7 / 0.8 = 87.5%但不是70%。
2.在βGT保護(hù)后,當(dāng)使用某種聚合酶(例如Taq聚合酶)時(shí),5hmC對(duì)照上的濃密5gmC可能停止聚合。為了避免可能的PCR偏差,建議將PfuTurbo Cx hotstart聚合酶(Agilent)或等同物用于文庫(kù)構(gòu)建中的終PCR擴(kuò)增步驟。
5mC Tet1氧化試劑盒
5mC Tet1 Oxidation
目錄號(hào):K003
單價(jià):每件套669美元
產(chǎn)品說明
5mC Tet1氧化試劑盒可用于將基因組DNA中的5-甲基胞嘧啶(5mC)轉(zhuǎn)化為5-羧基胞嘧啶(5caC)用于隨后的測(cè)序應(yīng)用。
每個(gè)試劑盒包含足夠的試劑,可根據(jù)推薦的方案進(jìn)行多達(dá)3個(gè)全基因組或9個(gè)基因座特異性測(cè)序反應(yīng)。
存儲(chǔ)
在抵達(dá)時(shí)在-80℃儲(chǔ)存5mC Tet1氧化試劑盒。Tet1蛋白對(duì)溫度敏感; 應(yīng)避免多次凍融。
5hmC TAB-Seq Kit
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Catalog No: K001
Unit Price: $969 / per kit
5hmC/5mC TAB-Array Kit (compatible to Infinium 450K Array)
Catalog No: K002
Unit Price: $869 / per kit
5mC Tet1 Oxidation Kit for the PacBio® RS Instrument
Catalog No: K004
Unit Price: $669 / per kit
Catalog No: S002
Unit Price: $30 each
Catalog No: S001
Unit Price: $30 each
上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司是實(shí)驗(yàn)試劑一站式采購(gòu)服務(wù)商
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